产品中心
PRODUCT CENTER
单体亲和素磁珠
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货号 |
产品名称 |
产品规格 |
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MMI 101 |
BcMag ™ 单体亲和素磁珠试剂盒 – 2.0 ml BcMag™ 单体亲和素磁珠 – 20 ml 10x封闭/洗脱缓冲液 – 25 ml 10x再生缓冲液 – 50 ml 10x PBS 缓冲液 |
一个 |
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MMI 102 |
BcMag™ 单体亲和素磁珠 |
5ml |
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MMI 103 |
BcMag™ 单体亲和素磁珠 |
10ml |
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如需大量订购，请联系我们报价！ |
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产品属性 |
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磁珠大小 |
直径~ 2.5 µm |
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磁珠密度 |
~1.47 x 108 beads/mg ( 2.5µm) |
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磁力大小 |
~40 EMU/g |
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磁化类型 |
超顺磁性 |
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稳定性 |
短期储存: pH 3-11;长期储存: pH 4-10 |
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结合能力 |
~ 1 mg 生物素化 BSA / ml磁珠 |
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储存 |
4℃储存 |
BcMag™ Monomer Avidin Magnetic Beads是一种高度均匀的超顺磁性微球，表面包裹着高密度的超纯（>97%）亚单位单体亲和素。单体亲和素源自天然四聚体蛋白，它保留了与天然亲和素相同的生物素结合特异性，但其生物素结合亲和力会有显著降低（kD=~10-8 M）。因此，通过使用温和的洗脱条件，例如含有2 mM生物素的缓冲液，就可以很容易地从单体亲和素中洗脱结合的生物素化分子，而不需要变性缓冲试剂，如8M盐酸胍或SDS去垢剂等苛刻的洗脱试剂。本款磁珠经过专门设计、测试和质量控制，可用于免疫沉淀、细胞分选，以及从细胞裂解液或杂交反应中快速一步捕获生物素化分子，如DNA、RNA、抗体或蛋白质。
亲和素（或链霉亲和素）和生物素之间表现的相互作用，是已知的非共价相互作用最高的一种。亲和素、链霉亲和素、单体亲和素及其类似物已成为探针研究实验中强大的亲和配体工具，被广泛应用于生化分析、诊断、亲和纯化和药物递送。
特点和优势
· 快捷，简单的一步法高通量操作;无需纯化柱或过滤器，或重复移液、离心等操作（图1）
· 极高的结合能力，在温和的条件下洗脱结合的生物素化分子
· 在温和的洗脱条件下纯化生物素化样品
· 极小的非特异性结合
· 对样本体积要求低，便于自动化操作
· 磁珠至少可以重复使用5次
材料要求
缓冲液
· 1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸钠, 0.15 M氯化钠; pH 7 )
· 1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8)
· 1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
l 磁力分离器（适用于手动操作）：根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择一下不同型号的磁力分离器：
l BcMag™ separator-2可以容纳两个单独的1.5 ml离心管(Cat.# MS-01);
l BcMag™ separator-6可以容纳六个单独的1.5 ml离心管(Cat.# MS-02);
l BcMag™ separator-24可以容纳24个单独的1.5-2.0 ml离心管(Cat.# MS-03);
l BcMag™ separator-50可以容纳一个单独的50 ml离心管，一个15ml的离心管，以及四个1.5ml离心管(Cat.# MS-04);
l BcMag™ separator-96 可以配合96 ELISA板使用 (Cat.#MS-06).
操作过程
操作过程中实验体积可根据需要放大或者缩小
提示：在纯化生物素化蛋白质、多肽和其他分子之前。用户应将试剂盒中的所有试剂温度平衡至室温，并用双蒸馏水配制1x工作溶液。
1.轻轻震动装有磁珠的试剂瓶，直到磁珠完全悬浮。将50µl磁珠转移到新试管中。
提示：客户应根据每个实验粗样品中生物素化分子的数量，根据经验确定最佳的磁珠使用量。过多的磁珠会导致背景更高；磁珠使用量少会造成产量降低。我们建议纯化50μg生物素化分子添加50μl完全悬浮的磁珠。
2. 将试管放在磁力分离器上1分钟。当磁珠完全沉淀时，去除上清液。取下试管加入四倍磁珠体积的d2H2O，充分混合。并将试管再次置于磁力分离器上1分钟，完全去除上清液。
3. 按照步骤2所述方式，用四倍磁珠体积的1x PBS缓冲液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠体积的1xBlocking / Elution Buffer，通过涡旋充分混合，并在室温下培养5分钟。将试管放在磁力分离器上1分钟。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠体积的1xRegeneration Buffer，通过涡漩充分混合，并将试管放在磁力分离器上1分钟。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠体积的1x PBS Buffer，并按照步骤2所述方式清洗磁珠。这些磁珠可以随时使用。
提示：必须立即使用磁珠，否则粘合能力将显著降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的样品，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下缓慢旋转培养30-60分钟。
8. 将试管放在磁力分离器上，保持试管留在分离器上的同时去除上清液。如步骤2所示，用1x PBS清洗磁珠，直到在280 nm处洗脱液的吸光度接近背景水平（OD 280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠体积的Blocking/Elution Buffer，通过移液器吹吸充分混合，并在室温下培养5-10分钟，将与磁珠结合的生物素化分子洗脱下来。
