产品中心
PRODUCT CENTER
一步法PCR纯化试剂盒
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货号 |
产品名称 |
产品规格 |
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AP101 |
BcMag™ 一步法PCR纯化试剂盒 |
1 ml |
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AP102 |
BcMag™ 一步法PCR纯化试剂盒 |
5 ml |
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简介
通过去除扩增酶，核苷酸，引物和缓冲液成分，PCR产物纯化过程对于成功的下游应用至关重要。PCR产物纯化有几种方式，包括用PEG或苯酚-氯仿提取沉淀，然后进行乙醇沉淀，这种方式虽然成本较低，但耗时且容易丢失DNA样品。其他方式包括基于磁珠或离心柱的纯化，是一种广泛使用且有效的方法，尽管它需要费力的结合-清洗-洗脱过程，并且涉及使用化学物质，如高浓盐溶液和乙醇，增加了残留和下游应用干扰的风险。
最近，酶纯化是一种替代方法，它使用核酸外切酶I消化过量的引物，以及使用碱性磷酸酶以使反应中的核苷酸去磷酸化。这种方法的缺点是它不能消除聚合酶，二价离子（Mg2+），脱氧核苷酸和其他成分。总之，上述PCR纯化方法具有以下局限性：
•不适用于高通量处理，难以自动化（离心柱）。
•手动处理样品可能很费力，并可能导致样品损失，产量降低和提取失败。
•高浓度盐溶液和乙醇可能被带入洗脱的DNA中并抑制聚合酶扩增。
•不能完全去除小于50 bp的DNA片段。
•纯化方案繁琐且耗时，无法消除聚合酶，二价离子（Mg2+），脱氧核苷酸和其他成分。
为了解决这些限制，Bioclone开发了一种新的一步法PCR纯化方法。
BcMag ™ 一步法PCR纯化试剂盒是独特设计的，用于快速，高效纯化PCR反应体系或者其他DNA反应的磁珠类产品。纯化过程不仅简单（如图一所示仅需一管，一步），而且可非常灵活的清除不同大小的DNA片段通过调整样品的处理时间，缓冲液的pH和去垢剂的浓度。将磁珠直接添加到反应完成的PCR体系或者其他DNA反应体系中，通过涡旋将杂质和磁珠结合并清除（例如：多余的引物，二聚体，接头分子，盐，去垢剂，dNTPs，以及酶类）。涡旋过后，磁珠被磁座吸附，同时上清液中包含已纯化的核酸样品。仅需1分钟，被纯化的DNA可用于下游应用，例如桑格测序，限制酶切，克隆，SNP检测，或者NGS文库准备。该磁珠可以在不到10分钟的时间内同时处理96个样品。
特点和优势：
l 简单的过程：不用移液，一步，一管
l 超快纯化过程：一分钟可以完成纯化
l 超高的纯度和回收率：回收率> 90%
l 高效的清除效率：可以清除过量的引物 (<100 mers ssDNA),二聚体，接头分子，盐
如 Mg2+，洗涤剂，dNTPS,各种酶，以及荧光物质。
l 无需纯化柱，以及过滤器，不用费力的反复移液吹吸，也不使用酒精。
l 高通量：可兼容多种不同的自动化液体处理系统
