产品中心
PRODUCT CENTER
一步法RNA清除试剂盒
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货号 |
产品名称 |
产品规格 |
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AU101 |
BcMag ™ 一步法RNA清除试剂盒 |
1ml |
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AU102 |
BcMag ™ 一步法RNA清除试剂盒 |
3ml |
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配方：液体成分（50 mM Tris-HCl，pH 8.0，50%甘油）
活性：1μl磁珠将在37°C下于15分钟内在50 mM Tris-HCl（pH 8.0）中，可将0.5μg酵母RNA（Sigma，目录号#R9001）降解。
装运：在常温环境下装运。收到后，将核酸酶磁珠保存在-20°C。等分试样以避免反复冷冻和解冻。
这种一步法RNA去除试剂盒为从样品中快速去除RNA提供了一种方便可靠的方法。该试剂盒包括一种独特的酶组合，可快速有效地降解RNA，用于各种下游应用。
简介
一步法RNA清除试剂盒使用核糖核酸酶A固定化磁珠，仅需单步操作就可从样品中有效去除RNA。RNase A是一种源自牛胰腺的核糖核酸酶，它是一种分子量为13.7 kDa的单链多肽。RNase A可将核糖核酸（RNA）非表面降解为较小的成分。用RNase A固定的磁珠可以有效地从生物样品中去除RNA，由于核酸酶稳定且与磁珠共价缀合，因此溶液中不残留核酸酶。
应用程序
• 用于目标分析
• 质粒和基因组DNA制备
• 通过流式细胞术和碘化丙啶（PI）染色进行细胞周期分析
• 从重组蛋白制剂中去除RNA
• 核糖核酸酶保护测定。与RNase T1结合使用
• 绘制DNA或RNA中的单碱基突变
特点和优势
l 高效的单管，无需纯化过程（图1）。
l 快速：在30分钟内可以处理96个样品，且手动时间小于10秒
l 在反应结束后，回收的核酸酶磁珠可以重复使用
l 易于从反应中分离核酸酶磁珠
l 良好的核酸酶结合稳定性
l 性价比高：无需过滤柱、吸附管、操作简单、不需要有机试剂，仅需少量的离心管。
l 适用于高通量实验：与许多不同的自动化液体处理系统兼容。
工作流程图
操作协议
A、 所需设备
A. 磁力架
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Item |
Source |
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离心管式磁力分离器
** 根据实验时生物样品的体积，使用者可以选择一下不同型号的磁力分离器 |
· BcMag™ separator-2可以容纳两个单独的1.5 ml离心管(Cat.# MS-01); · BcMag™ separator-6可以容纳六个单独的1.5 ml离心管(Cat.# MS-02); · BcMag™ separator-24可以容纳24个单独的1.5-2.0 ml离心管(Cat.# MS-03); · BcMag™ separator-50可以容纳一个单独的50 ml离心管，一个15ml的离心管，以及四个1.5ml离心管(Cat.# MS-04); |
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BcMag 96孔磁力分离器. |
· BcMag 96-孔磁力分离器(单面) 可与96孔PCR板和96孔微孔板或其他型号离心板兼容使用 (Blioclone, Cat#: MS-06) |
B、 实验过程
· 不要使用含有有机溶剂的缓冲液。
• 通常，根据RNA的浓度，将所需的磁珠直接添加到任何标准缓冲液中。（1μl磁珠将消化10μg酵母RNA）。
表1工作条件
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条件 |
最优条件 |
功能范围 |
抑制作用 |
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温度 |
60℃ |
15–70°C |
N/A |
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pH值 |
7.6 |
6.0–10.0 |
N/A |
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Zn2+ |
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是的 |
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Cu2+ |
N/A |
N/A |
是的 |
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0-100 mM NaCl |
优先切割单链和双链RNA以及RNA-DNA杂种中的RNA链。
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N/A |
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>300mmol氯化钠 |
优先切割单链RNA |
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盐酸胍 |
N/A |
N/A |
4M+0.1M 2-巯基乙醇 |
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十二烷基硫酸钠 |
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是的 |
1.震动试剂瓶，使磁珠重新悬浮，直至完全混匀。
提示：分液前将磁珠混匀是非常重要的步骤，不要让混匀的磁珠静置超过两分钟，使用时每两分钟混匀一次磁珠
2.在反应体系中加入适量的磁珠。
3.在1-2分钟内通，过移液器缓慢上下移液20-25次，将样品与磁珠混合；或以2000 rpm
的转速旋转样品2分钟。
4.在37℃下连续旋转培养15分钟。
5.将样品板或样品管放在磁力分离器上30秒或直到溶液澄清。（选项：以3500 rpm离心
45秒）
6.当样品板保持在磁力分离器上时，将上清液转移到干净的板/管中，该样本即可用于下游
应用。
