产品中心
PRODUCT CENTER
快速内毒素清除试剂盒
货号 |
产品名称 |
产品规格 |
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MKE101 |
BcMag™ 快速内毒素清除试剂盒 试剂盒组分: 2ml:快速内毒素清除磁珠 10ml:10*再生缓冲液 |
2 ml试剂盒 |
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MKE102 |
BcMag™ 快速内毒素清除磁珠 |
5 ml |
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MKE103 |
10*再生缓冲液 |
20ml |
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Specificities |
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组成 |
表连接有多粘菌素B的超顺磁珠 |
磁化强度 |
~60 EMU/g |
磁化类型 |
超顺磁 |
有效浓度 |
2.5 g/ml |
浓度 |
50 mg/ml ( d2H2O ) |
结合能力 |
≥ 9,995 EU (内毒素单位) / ml |
储存 |
室温运输,收到后保存在 4°C . |
内毒素,又叫做脂多糖(LPS),是一种具有复杂分子结构的热原。它最内层核心区域由疏水性脂肪酸基团组成,中部和最外层区域由亲水性多糖组成(图1)。它们是组成革兰氏阴性细菌病原体(如大肠杆菌、沙门氏菌、志贺菌、假单胞菌、奈瑟菌、流感嗜血杆菌、百日咳杆菌和霍乱弧菌)细胞壁外膜的一部分。它们在细菌细胞破坏(死亡、细胞溶解)后释放到血液循环中。
图一:内毒素结构
内毒素是生物产品中发现的主要污染物,它是引发生物效应研究产生不利影响主要成分物质。在生物技术行业中,革兰氏阴性菌(如大肠杆菌)被广泛用于生产重组类产品,如蛋白质、质粒DNA和疫苗等。这些产品在生产过程中非常容易被内毒素污染。去除生物产品中的内毒素是非常关键的步骤,因为它会导致多种病理性生理效应,如发热、颤抖、感染性休克、中毒性肺炎和呼吸系统症状。
去除内毒素是蛋白质或DNA纯化过程中最具挑战性的下游过程之一。目前,有几种方法可用于减少生物样品制剂的内毒素污染,包括亲和色谱法,如固定化多粘菌素B、L-组氨酸和聚L-赖氨酸;阴离子交换色谱法;凝胶过滤;超滤;蔗糖梯度离心和Triton X-114液相分离。这些技术在减少生物样品内毒素污染方面的成功与否在很大程度上取决于目标分子的性质。例如,超滤和离子交换色谱法是去除内毒素污染物的常用技术。虽然超滤可以有效地去除水中的内毒素,但它不适用于蛋白质溶液样品,因为强大的外力因素会损坏蛋白质结构。而使用阴离子交换方法可以有效地去除内毒素,但因为目标生物分子也会被吸附而导致生物样品的回收率降低。目前,市场上销售的许多内毒素去除产品都是由传统色谱基质制成,如琼脂糖树脂或色谱柱。使用这些材质的纯化产品使得内毒素去除过程繁琐、耗时,无法对微量生物样品进行处理,并且难以适应自动化设备。Bioclone公司开发出一种非常高效的基于磁珠的内毒素去除系统来克服这些问题。
BcMag™ Quick Endotoxin Removing Resin是一种共价链接有高密度,多聚混合素B的磁性微球。本款产品是专门为快速去除各种生物样品中的内毒素而设计的。多粘菌素B是一种多肽类抗生素,对大多数内毒素的脂质a部分具有非常高的结合力。本款磁珠兼具了亲和蛋白纯化的特点(低成本、操作简单、高特异性和大容量)和具有磁性的优势,可以实现高效的手动或自动高通量快速去除内毒素过程。
操作流程
用磁性微粒进行纯化过程非常简单(图2)。只需要将磁珠与样品混合,并连续旋转培养足够的时间就可以完成纯化。在混匀过程中,磁珠保持悬浮在样品溶液中,使内毒素与磁珠表面被固定的多粘菌素B充分结合。孵育完成后,沉淀磁珠,使用磁力分离架将其与样品分离。将无内毒素上清液转移至新试管中。
图2 :内毒素清除过程