产品中心
PRODUCT CENTER
一步法脱落细胞DNA纯化试剂盒
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AS101 |
BcMag ™ 一步法脱落细胞DNA纯化试剂盒 |
50 preps |
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AS102 |
BcMag ™ 一步法脱落细胞DNA纯化试剂盒 |
10 preps |
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组件 |
存储条件 |
50preps，目录号AS101 |
100 preps，目录号AS102 |
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BcMag™ U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
运输和储存：根据上表，在收到商品时储存试剂盒中各组分。
简介
脱落细胞DNA是指从丢失的皮肤细胞和其他生物材料中收集的DNA，这些生物材料通常指手指、手掌、脚趾和脚掌上的指纹突起部位留在触摸表面的脱落细胞。这一生物技术在盗窃、性暴力到谋杀等一系列刑事案件的取证中起着极为重要的作用。例如，在谋杀或性侵犯案件中，可以通过研究用于盗窃的车辆的方向盘，或在谋杀和性侵案件中的武器和衣物，来收集非常有价值的犯罪者的DNA证据。此外，从犯罪现场收集“脱落细胞DNA”以确定犯罪嫌疑人可能非常有价值，特别是在没有其他类型的证据的情况下。
通常，DNA分析过程始于从法医检样中提取DNA。DNA的提取和回收过程是DNA分析过程中最关键的一步。几乎所有的实验都需要足够数量的，经过定量和定性的DNA才可以完成。因此在法医鉴定中，DNA鉴定能否成功取决于现有DNA模板的可用性。所以，就需要更好的DNA提取回收方法，尤其是在处理含有微量DNA的脱落细胞样本时。各种各样的方法被用来增加证据DNA的数量和质量。然而，由于提取方式的不同和定量方法的准确性差异，DNA提取过程可能导致初始脱落细胞含有的DNA的20%至90%损失掉。而且，目前用于法医DNA案件的纯化技术耗时且过程繁琐。
此外，对于使用纯化柱进行纯化操作的方式很容易导致DNA丢失，从而使低拷贝或受损的脱落细胞样本的分型实验失败。因此，直接PCR扩增法被提出作为避免脱落细胞样本DNA丢失的方法之一。该技术不需要提取、定量和浓缩等步骤，可以最大程度保留生物样本中的DNA。同时，可以最大程度减少不同的实验室员操作带来的误差和样本处理过程中的DNA污染，并减少样本操作过程的处理时间和成本。然而，许多DNA样本需要直接从固体物质上提取，如衣服、室内装潢材料、纸张、口香糖和烟头等，但直接从这些固体上提取核酸，就会造成提取出的DNA携带高浓度的PCR抑制剂。Bioclone公司开发了一种全新的基于磁珠法的一步DNA纯化系统，可以克服以上这些缺点。
BcMag™ One step Touch DNA Direct Kit使用新型负相色谱磁珠，可以从大多数微量脱落细胞样本中快速提纯出更高质量和更高回收率的DNA。这些样本包括体液、污渍、体液拭子、脱落细胞、烟头、毛囊、指甲刮屑、上皮细胞、咬痕、精液等掉落的生物体细胞DNA样本等。经过特殊设计的磁珠表面具有我们专有的表面化学功能基团，一旦与样品混合，可同时裂解细胞并捕获PCR抑制剂（图1）。
然后用磁力架去除磁珠-PCR抑制剂的复合物，同时保留在溶液中的纯净DNA可用于下游STR分析。本款核酸纯化试剂盒提供了一种全新的快速简单的DNA纯化方法，只需一个试管，无需反复的溶液转移，纯化过程不需要载体RNA。同时，这种核酸提取方式还减少了DNA丢失的风险，以及提取缓冲液在传统核酸提取的，结合-洗涤-洗脱程序中可能带来的污染和DNA丢失风险。在将样本完全裂解后，它能够在不到15分钟的时间内处理96个样品，实际手动操作时间不会超过1分钟。
图2： 脱落细胞 DNA纯化的原理和工作流程
1.向生物样品中添加功能磁珠。
2.将样品与磁珠和蛋白酶K混合并裂解细胞。
3.通过旋涡/移液吹吸方式对磁珠进行混合，以捕获PCR抑制剂。
4.用磁力架沉淀磁珠。
5.吸取含有纯净DNA的上清液
应用方向
纯化的DNA适用于敏感的下游应用，如PCR、qPCR、单核苷酸多态性（SNP）、短串联重复序列（STR）基因分型、基因分型或新一代测序（NGS）。
特点及优势
l 快速高效的纯化方案：无需液体转移，只需一个试管，无需事先分离DNA，可直接用于放大实验的工作流程。
l 节约时间成本：可在不到一小时内处理96个样本。
l 最高的核酸回收率：提取过程中的DNA损失最小。
l 有效去除抑制剂（图1）：多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、鞣质、黑色素、肝素、洗涤剂、牛仔布染料、二价阳离子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性价比高：无需离心柱、过滤器、不用反复的重复移液和使用有机试剂。
l 可用于高通量实验：与许多不同的全自动核酸提取系统兼容。
本产品用于法医学、人类鉴定和亲子鉴定分子生物学应用。本产品不适用于疾病诊断、预防或治疗。
一般参考文献
1. Van Oorschot, R., Jones, M. DNA fingerprints from fingerprints. Nature 387, 767 (1997).
2. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
3. Jo-Anne Bright, Susan F. Petricevic. Recovery of trace DNA and its application to DNA profiling of shoe insoles, Forensic Science International,Volume 145, Issue 1, 2004,Pages 7-12
4. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
