产品中心
PRODUCT CENTER
骨骼和牙齿DNA纯化试剂盒
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AB101 |
BcMag ™ 骨骼DNA纯化试剂盒 |
50preps |
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AB102 |
BcMag ™ 骨骼DNA纯化试剂盒 |
100preps |
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组件 |
存储条件 |
目录号：AB-101（50Preps） |
目录号：AB-102（100 Preps ） |
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BcMag™ HO-DNA Beads |
4°C |
0.75 ml |
1.5 ml |
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1x Lysis Buffer |
4°C |
5.0 ml |
10 ml |
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1x Elution Buffer |
4°C |
1.5ml |
3.0ml |
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Proteinase K (20mg/ml) |
-20°C |
10 mg |
20 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
0.5 ml |
1.0 ml |
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1 M DTT |
-20°C |
77 mg |
154 mg |
搬运和储存：根据上表，在收到商品时储存试剂盒中各组分。
简介
骨骼和牙齿通常是鉴定人类遗骸的唯一DNA样本。从骨骼和牙齿中纯化出DNA在许多分子生物学应用中都很重要，包括法医分析，古代DNA分析和遗传研究。且从骨骼和牙齿等复杂样品中有效提取DNA比使用新鲜的生物组织要困难得多。因为，骨骼是一种高度组织化、复杂化和专门化的结缔组织，具有极高的钙离子浓度。骨中的大部分DNA存在于骨细胞中。由于骨骼是具有高钙含量的刚性结缔组织，骨骼和牙齿中的DNA通常比软组织中的DNA保存得更好。而骨骼中的牙齿则由牙釉质、牙本质、牙骨质和牙髓组织组成。牙本质和牙髓都含有DNA。由于骨骼是高度矿化的组织，选择有效的DNA提取方式，对于消除PCR抑制剂和避免DNA提取溶液中参杂过多矿物至关重要。
从长期暴露于各种环境条件下的骨骼和牙齿中提取DNA和进行STR数据分析，已成为识别失踪人员和指认未知遗骸的有力工具。这类检材由于矿化严重、内源性DNA含量低、收环境，细菌等影响、死后DNA损伤，以及存在与DNA样本共同提取的环境物质中存在大量PCR抑制剂，因此，从受损样本中回收DNA仍然具有挑战性。尽管目前已经有一些核酸提取技术可用于骨骼DNA提取，但用于法医检测的骨骼核酸提取方式仍存在一些缺陷。在实验过程中，DNA模板含量低、有显著降解和普遍存在的PCR抑制成分，这些因素都会对样本的识别造成影响，限制STR图谱的发展。由于上述影响因素，选择有效的DNA提取方式对于最大量减少矿物质提取时残留和去除聚合酶链反应（PCR）抑制剂至关重要。
BcMag™ Bone and Teeth DNA Purification Kit是经过独特设计的，用于从骨骼和牙齿样本中高效、有序地提取总核酸。该试剂盒使用我们独特的专有磁珠与经过优化的脱矿缓冲液相结合，以提高DNA的产量和质量。纯化的基因组DNA具有极高的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR、STR等。该核酸提取过程采用温和的裂解条件，避免了苛刻条件，如碱性裂解，和使用裂解细胞的有毒化学品对核酸的损害，以保持DNA完整性，并且提取过程无需耗时的从样品中清除有机溶剂。
骨骼DNA分离的工作流程
1.向样品中加入裂解缓冲液和蛋白酶K裂解骨骼，并在65°C下孵育24小时。
2.添加功能性磁珠，并将磁珠与样品一起涡旋或吹吸混匀，结合DNA。
3.清洗磁珠
4.使用磁力分离器从样品中分离磁珠。
5.从磁珠上洗脱DNA
骨骼和牙齿DNA提取纯化试剂盒用于多种分子生物学应用，包括：
•法医分析：从骨头和牙齿中提取的DNA通常用于法医分析，以识别个人并破案。
•古代DNA分析：从骨骼和牙齿中提取的DNA可用于研究古代种群和物种的遗传学。
•遗传学研究：从骨骼和牙齿中提取的DNA通常用于遗传学研究，以确定某些基因突变或标记的存在。
特点和优势：
•高质量DNA提取：骨骼和牙齿是难以液化的坚韧组织，但骨骼和牙齿DNA纯化试剂盒提供了专门用于提取高质量DNA的试剂和方案。
•易于使用：骨骼和牙齿DNA纯化试剂盒易于使用，为从骨骼和牙齿中纯化DNA提供了一个简单的操作过程。
•高产率：骨骼和牙齿DNA纯化试剂盒旨在提高DNA提取的回收率，这对下游应用非常重要。
一般参考资料
1. Loreille OM, Diegoli TM, Irwin JA, Coble MD, Parsons TJ. High efficiency DNA extraction from bone by total demineralization. Forensic Sci Int Genet. 2007 Jun;1(2):191-5
2. Mckinnon M, Henneberg M, Higgins D. A review of the current understanding of burned bone as a source of DNA for human identification. Sci Justice. 2021 Jul;61(4):332-338.
3. Jakubowska J, Maciejewska A, Pawłowski R. Comparison of three methods of DNA extraction from human bones with different degrees of degradation. Int J Legal Med. 2012 Jan;126(1):173-8.
4. Emery MV, Bolhofner K, Winingear S, Oldt R, Montes M, Kanthaswamy S, Buikstra JE, Fulginiti LC, Stone AC. Reconstructing full and partial STR profiles from severely burned human remains using comparative ancient and forensic DNA extraction techniques. Forensic Sci Int Genet. 2020 May;46:102272.
5. Prediction of autosomal STR typing success in ancient and Second World War bone samples. Zupanič Pajnič I, Zupanc T, Balažic J, Geršak ŽM, Stojković O, Skadrić I, Črešnar M. Forensic Sci Int Genet. 2017 Mar;27:17-26.
