产品中心
PRODUCT CENTER
一步法植物DNA纯化试剂盒
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AQ101 |
BcMag ™ 一步法植物DNA纯化试剂盒 |
50 preps |
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AQ102 |
BcMag ™ 一步法植物DNA纯化试剂盒 |
100 preps |
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组件 |
存储条件 |
50 preps，目录号#AQ101 |
100 preps，目录号#AQ102 |
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BcMag™ U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
运输和储存：根据上表，在收到货物时储存各组分。
一步法植物DNA纯化试剂盒可以从各种植物样品来源中，快速，无需离心柱提取出基因组DNA。本试剂盒使用独特的专有磁珠和缓冲液，它可以有效地裂解细胞并去除杂质，使DNA保持完整。通过同时处理>96个样品，在不到30分钟的时间内提高核酸产量并最大程度地减少DNA损失。
简介
植物基因组突变分析是植物遗传学研究和经济作物改良研究中重要的一个研究方向。在其研究过程中，植物学家需要用到许多基因学研究工具来解决各种问题，如植物的抗病性、转基因种子的产生、作物产量提高、群体遗传学和植物生理学。在进行可重复的DNA分析研究中，如实时定量PCR、基因测序分型（GBS）或新一代测序（NGS），需要从植物的叶片、种子、根或其他植物材料中提取出高质量的DNA。
目前使用的提取植物DNA的标准程序，可能非常费时和需要大量的人力参与。而且，在植物基因分型等特定实验中，更需要应用对长链DNA提取的有效方法。例如，传统的植物DNA提取方式，需要用蛋白酶K消化4小时甚至过夜，然后再用苯酚：氯仿提取和乙醇沉淀，非常费时费力。其他提取技术，如二氧化硅膜结合和洗脱试剂盒，近些年也已广泛应用在此提取领域。这些提取技术都是基于正色谱法的纯化技术。该技术利用高浓度的解离盐，如盐酸胍，将DNA与二氧化硅膜结合。然后再用含有盐/乙醇溶液的洗涤试剂清洗核酸结合后的硅胶柱或磁珠，以除去样品中含有的杂质类生物分子。最后，再使用Tris洗脱缓冲液或超纯水洗脱下结合在纯化柱或磁珠上的纯净DNA。这种结合-清洗-洗脱的核酸提取过程非常耗时，需要多次清洗和移液步骤。在重复的移液过程中，就会导致大量的DNA损失（20-40%）和断裂。此外，高浓度的解离盐和其他杂质，很容易残留到洗脱的DNA或RNA溶液中，影响核酸产物的最终纯度和定量，以及下游反应的酶活性，如PCR反应。
BcMag™ One-Step Plant DNA Purification Kit可以快速、无需纯化柱等耗材，从各种植物样品中提取出基因组DNA，包括叶、茎、芽、花、水果、种子等。该试剂盒使用我们独特的专利磁珠和缓冲液，可以有效地裂解细胞，然后磁珠会有效的去除掉缓冲液中的所有杂质，使DNA保留在上清液中。该提取过程采用温和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解条件下，如碱性裂解和使用有毒化学品用于裂解细胞对核酸的损害，这样就保持了DNA完整性和去除了从样品中清除有机溶剂的耗时过程。此外，本产品中的磁珠在不用于提取DNA的情况下，也可在单个步骤中用于从样品中清除PCR抑制剂（图1）。使用本试剂盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸产量，并将传统的DNA纯化技术中耗时的“结合-洗涤-洗脱”过程造成的DNA损失降至最低。在将样本完全裂解后，它能够在不到30分钟的时间内完成超过96个样品的DNA纯化。纯化出的基因组DNA具有高度的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR等。
图1. PCR 抑制剂的清除
工作流程（图2）
图2：一步法植物DNA纯化试剂盒工作流程
1.使用钢珠将样品打碎。
2.离心并将样品粉碎的颗粒转移到新试管中。
3.将样品与磁珠和蛋白酶K混合并加热以裂解细胞。
4.旋涡使磁珠与PCR抑制剂充分结合。
5.用磁力架清除磁珠。
6将含有纯净DNA的上清液转移。
应用
纯化的DNA可用于下游应用，例如PCR，qPCR，单核苷酸多态性（SNP），基因分型，测序基因分型（GBS），新一代测序（NGS）等。
特点和优势：
l 快速高效的纯化方案：无需液体转移，只需一个试管，无需事先分离DNA，可直接用于放大实验的工作流程。
l 节约时间成本：可在不到一小时内处理96个样本。
l 最高的核酸回收率：提取过程中的DNA损失最小。
l 有效去除抑制剂：多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、鞣质、黑色素、肝素、洗涤剂、牛仔布染料、二价阳离子，如Ca2+、Mg2+等（见图片2“PCR抑制剂去除”）。
l 性价比高：无需离心柱、过滤器、不用反复的重复移液和使用有机试剂。
l 可用于高通量实验：与许多不同的全自动核酸提取系统兼容。
