产品中心
PRODUCT CENTER
一步法鼠尾DNA纯化试剂盒：
快速、高效、可靠的DNA提取方式
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AN101 |
BcMag公司™ 一步法鼠尾DNA纯化试剂盒 |
50 preps |
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AN102 |
BcMag公司™ 一步法鼠尾DNA纯化试剂盒 |
100 preps |
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组分 |
存储条件 |
50个preps，目录号#AN101 |
100 preps，目录号#AN102 |
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BcMag™ U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
运输和储存：根据上表，在收到货物时储存各组分。
简介
从在一些生物学研究中，对于老鼠尾巴或耳朵DNA的提取方式可能非常耗时和浪费体力。在一些特殊应用当中，如使用小鼠
尾部DNA进行转基因小鼠基因分型实验，则需要长链DNA的提取方法。例如，传统的小鼠尾部DNA提取需要用蛋白酶K进行4小时至过夜的消化，然后进行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀操作。其他提取技术，如使用二氧化硅材质原料结合DNA，并进行清洗洗脱的试剂盒，最近也已可用与此类核酸的提取。这种提取技术是基于正相色谱纯化选择的方式。使用高浓度盐裂解结合溶液，如盐酸胍，将DNA与二氧化硅结合。在结合核酸后，再使用盐/乙醇溶液清洗硅胶柱或硅胶磁珠，从样品中清除杂质生物分子。最后，使用Tris缓冲液或水洗脱硅胶柱或硅胶磁珠，以洗脱下纯净的DNA。这种结合-清洗-洗脱的操作过程非常耗时，而且需要多次清洗和移液操作。重复的移液步骤会导致DNA大量丢失（20-40%）和DNA链的断裂。此外，高盐裂解液和其他杂质，很容易残留在洗脱的DNA或RNA中，对最终纯度和定量以及下游酶活性（如PCR反应酶）产生影响。
BcMag™ Onestep Mouse Tail DNA Direct Kit 可以从小鼠尾巴、耳朵、耳洞或其他动物组织中，快速的提取出基因组DNA，纯化过程无需使用纯化柱。该试剂盒使用我们独特的专利磁珠和缓冲液，可以有效地裂解细胞，然后磁珠会有效的去除掉缓冲液中的所有杂质，使DNA保留在上清液中。该提取过程采用温和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解条件下，如碱性裂解和使用有毒化学品用于裂解细胞对核酸的损害，这样就保持了DNA完整性和去除了从样品中清除有机溶剂的耗时过程。此外，本产品中的磁珠在不用于提取DNA的情况下，也可在单个步骤中用于从样品中清除PCR抑制剂（图1），而无需DNA提取步骤。
本试剂盒提取过程增加了DNA的完整性，提高了核酸的产量，并最大程度地减少了传统DNA提取技术过程中，耗时的“结合-洗涤-洗脱”操作过程引起的DNA损失。样品裂解后，仅需简单的一步提取过程可以同时处理>96个样品，并在不到30分钟内完成DNA纯化。纯化的基因组DNA具有极高的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR。
图2一步法鼠尾DNA分离试剂盒的工作流程
本款磁珠是特别设计的，它一旦与细胞裂解液混合，就能快速捕获杂质。然后，纯净的DNA保留在溶液中，磁珠-杂质复合物被磁铁磁性吸附去除。
1.向样品中添加功能磁珠。
2.将样品与磁珠和蛋白酶K混合以裂解细胞。
3.通过旋转/吹吸方式混合磁珠，以捕获PCR抑制剂。
4.用磁座去除磁珠。
5.吸取纯净的DNA/RNA的上清液
应用
纯化的DNA可用于下游应用，例如PCR，qPCR，单核苷酸多态性（SNP），短串联重复序列（STR）基因分型，基因分型，新一代测序（NGS，兽医基因分型等）。
特点和优势：
l 快速高效的纯化方案：无需液体转移，只需一个试管，无需事先分离DNA，可直接用于放大实验的工作流程。
l 节约时间成本：可在不到一小时内处理96个样本。
l 最高的核酸回收率：提取过程中的DNA损失最小。
l 有效去除抑制剂：多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、鞣质、黑色素、肝素、洗涤剂、牛仔布染料、二价阳离子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性价比高：无需离心柱、过滤器、不用反复的重复移液和使用有机试剂。
l 可用于高通量实验：与许多不同的全自动核酸提取系统兼容。
