产品中心
PRODUCT CENTER
一步法昆虫DNA纯化试剂盒
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AM101 |
BcMag ™ 一步法昆虫DNA纯化试剂盒 |
50 preps |
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AM102 |
BcMag ™ 一步法昆虫DNA纯化试剂盒 |
100 preps |
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组件 |
存储 |
50 preps，目录号#AM101 |
100 preps，目录号#AM102 |
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BcMag™ U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
运输和储存：根据上表，在收到货物时储存各组分。
“BcMag™ 一步法昆虫DNA纯化试剂盒可以从新鲜，冷冻或储存的昆虫标本（如蚊子，蜜蜂，虱子，蜱和黑腹果蝇）中快速，无需离心柱，提取高质量基因组DNA。该试剂盒使用我们独特的专有磁珠和缓冲液，有效裂解细胞，同时去除水性缓冲液中的PCR抑制剂类杂质，使DNA不受影响。
简介
入侵的昆虫会破坏生态系统，每年造成数十亿美元的管理成本和收入损失。快速检测是防止入侵昆虫传播的关键步骤，但必须提高大规模样本收集的检测能力，例如从粘性陷阱中收集的昆虫。使用定量PCR，测序基因分型（GBS）或新一代测序（NGS）进行可重复的DNA分析需要从昆虫中提取高质量的DNA。
提取昆虫DNA的标准流程可能非常耗时且需要大量手动操作。且在植物基因分型等特定应用中需要长链DNA提取方法。例如，传统的植物DNA提取需要用蛋白酶K消化4小时至过夜，然后进行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技术，例如二氧化硅结合和洗脱试剂盒，近些年已经非常成熟。这些技术基于阳性色谱纯化选择。高浓度的盐溶液（例如盐酸胍）会将DNA与二氧化硅结合。核酸结合后，用盐/乙醇溶液洗涤二氧化硅离心柱或磁珠，以清除样品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脱缓冲液或水洗脱离心柱或磁珠以洗脱纯化后DNA。这种结合-清洗-洗脱过程非常耗时，需要多次清洗和移液步骤。重复的移液步骤会导致相当大的DNA损失（20-40%）和丢失。此外，高盐溶液和其他杂质很容易残留进洗脱的DNA或RNA中，损害最终的纯度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
BcMag™ 一步法昆虫DNA纯化试剂盒可以从新鲜，冷冻或储存的昆虫标本（如蚊子，蜜蜂，虱子，蜱和黑腹果蝇）中快速，无需离心柱，提取高质量基因组DNA。该试剂盒使用我们独特的专有磁珠和缓冲液，有效裂解细胞，同时去除水性缓冲液中的PCR抑制剂类杂质，使DNA不受影响。该提取过程采用温和的裂解条件，避免了严苛裂解条件对核酸的破坏，如碱性裂解和有毒化学物质裂解细胞；保证了DNA的完整性和避免了残留在样品中有机溶剂耗时的清除过程。此外，本试剂盒中磁珠还可以一步从样品中清除PCR抑制剂（图1），而无需DNA提取过程。
本试剂盒提取过程增加了DNA的完整性，提高了核酸的产量，并最大程度地减少了传统DNA提取技术过程中，耗时的“结合-洗涤-洗脱”操作过程引起的DNA损失。样品裂解后，仅需简单的一步提取过程可以同时处理>96个样品，并在不到30分钟内完成DNA纯化。纯化的基因组DNA具有极高的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR。
图2一步法昆虫DNA提取试剂盒的工作流程
1. 使用钢珠在打珠器中破碎样品。
2. 离心并将上清液转移到新试管中。
3. 将样品与磁珠和蛋白酶K混合并加热以裂解细胞。
4. 涡旋磁珠以捕获PCR抑制剂。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有纯净DNA的上清液。
性能
纯化的DNA可用于许多下游应用，例如PCR，qPCR，单核苷酸多态性（SNP），短串联重复序列（STR）基因分型，基因分型，新一代测序（NGS，兽医基因分型等）。
特点和优势：
• 快速有效的提取方案：无需事先进行DNA分离，细胞裂解后可直接仅需纯化流程，不需要液体转移，仅需一个试管。
l 节约时间成本：可在不到一小时内处理96个样本。
l 最高的核酸回收率：提取过程中的DNA损失最小。
l 有效去除抑制剂：多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、鞣质、黑色素、肝素、洗涤剂、牛仔布染料、二价阳离子，如Ca2+、Mg2+等（见图片2“PCR抑制剂去除”）。
l 性价比高：无需离心柱、过滤器、不用反复的重复移液和使用有机试剂。
• 可用于高通量实验：与许多不同的全自动核酸提取系统兼容
