产品中心
PRODUCT CENTER
革命性细菌DNA提取方式：一步法提取试剂盒
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货号 |
产品名称 |
规格 |
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AE101 |
BcMag™ 一步法细菌DNA纯化试剂盒 |
50次 |
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AE102 |
BcMag™ 一步法细菌DNA纯化试剂盒 |
100次 |
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组分 |
存储条件 |
50 preps，货号#AE-101 |
100 preps，货号#AE-102 |
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BcMag™ U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
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运输和储存：根据下表，在收到货物时储存各组分。
简介
提取细菌DNA的标准流程可能非常耗时，属于劳动密集型的特定应用（如细菌基因分型），需要长时间的DNA提取过程。例如，传统的细菌DNA提取需要用蛋白酶K裂解，然后进行苯酚：氯仿提取和酒精沉淀。其他技术，例如二氧化硅结合和洗脱试剂盒，近些年已经非常成熟。这些技术基于阳性色谱纯化选择。高浓度的盐溶液（例如盐酸胍）会将DNA与二氧化硅结合。核酸结合后，用盐/乙醇溶液洗涤二氧化硅离心柱或磁珠，以清除样品中的其他生物分子。最后，使用Tris洗脱缓冲液或水洗脱离心柱或磁珠以洗脱纯化后DNA。这种结合-清洗-洗脱过程非常耗时，需要多次清洗和移液步骤。重复的移液步骤会导致相当大的DNA损失（20-40%）和丢失。此外，高盐溶液和其他杂质很容易残留进洗脱的DNA或RNA中，损害最终的纯度和定量以及下游的酶活性，如PCR。
BcMag™一步法细菌DNA纯化试剂盒，可以从微生物（如革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌）中快速，无需离心柱提取基因组DNA。该试剂盒使用我们独特的专有磁珠和缓冲液，可以有效裂解细胞，同时去除缓冲液中溶解的PCR抑制剂类杂质，不影响DNA使用。该提取过程采用温和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解条件下，如碱性裂解和使用有毒化学试剂时，对于裂解细胞核酸的损害，这样就保持了DNA完整性和避免了从样品中清除有机溶剂的耗时过程。此外，本产品中的磁珠在不用于提取DNA的情况下，也可在单个步骤中用于从样品中清除PCR抑制剂（图1）。使用本试剂盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸产量，并将传统的DNA纯化技术中耗时的“结合-洗涤-洗脱”过程造成的DNA损失降至最低。在将样本完全裂解后，它能够在不到30分钟的时间内完成超过96个样品的DNA纯化。纯化出的基因组DNA具有高度的完整性，可用于各种下游应用，如qPCR、STR等。
BcMag™ 一步法细菌DNA纯化试剂盒工作流程
1. 使用钢珠在打珠器中破碎样品。
2. 离心并将上清液转移到新试管中。
3. 将样品与磁珠和蛋白酶K混合并加热以裂解细胞。
4. 涡旋磁珠以捕获PCR抑制剂。
5. 用磁力架吸附磁珠。
6. 吸出含有纯净DNA的上清液。
应用
纯化的DNA可用于下游应用，例如PCR，qPCR，单核苷酸多态性（SNP），短串联重复序列（STR）基因分型，基因分型，新一代测序（NGS，兽医基因分型等）。
特点和优势：
l 快速高效的纯化方案：无需液体转移，只需一个试管，无需事先分离DNA，可直接用于放大实验的工作流程。
l 节约时间成本：可在不到一小时内处理96个样本。
l 最高的核酸回收率：提取过程中的DNA损失最小。
l 有效去除抑制剂：多酚化合物、腐殖酸/黄腐酸、酸性多糖、鞣质、黑色素、肝素、洗涤剂、牛仔布染料、二价阳离子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性价比高：无需离心柱、过滤器、不用反复的重复移液和使用有机试剂。
l 可用于高通量实验：与许多不同的全自动核酸提取系统兼容。
